Técnica de Edición de Ácidos Nucléicos en la Enfermedad de Parkinson

CRISPR / Cas9 editado sRAGE-MSC protegen la muerte neuronal en el modelo de enfermedad de Parkinson
Tipo de edición:	Ex vivo; Somático
Dirigido hacia:	ADN de UCB-MSC que secreta RAGE soluble (sRAGE)
Dirigido por:	CRISPR- Cas 9 y ARNg
Vectores:	pZDonor-AAVS1
Órgano o célula a tratar	Cerebro, células neuronales en la sustancia negra y el cuerpo estriado.
Vía de administración:	Parenteral. Mediante inyección.
Resultados:	A corto y mediano plazo: reducir la muerte de células neuronales en el Cuerpo Estriado y la Sustancia Negra y mejorar el movimiento después del tratamiento con UCB-MSC que secreta sRAGE en ratones con EP mediante la inhibición de RAGE en células neuronales. A largo plazo: el enfoque terapéutico basado en UCB-MSC secretor de sRAGE podría ser una estrategia de tratamiento potencial para enfermedades neurodegenerativas, incluida la EP.

 

Referencia Bibliográfica: 

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6457706/

Terapia con StemCells para la Enfermedad de Parkinson

 

 Se utilizaron células madre pluripotentes inducidas (células iPS) y las células madre embrionarias (ESC), para desarrollar neuronas de dopamina. Las ESC se recogen de la masa celular interna del blastocisto temprano y se han generado varias líneas de células ESC humanas a partir de embriones en exceso mediante procedimientos de fertilización in vitro. Por otro lado, las iPSC se generan mediante la reprogramación de una célula somática adulta en una célula madre, mediante la expresión de una serie de factores de transcripción que podrían inducir pluripotencia. Los investigadores inyectan células progenitoras dopaminérgicas directamente en un área del cerebro asociada con la degeneración neural en la enfermedad de Parkinson.

A corto y mediano plazo las células injertadas pudieron secretar dopamina y estimular neuronas en el cerebro. Las células implantadas sobrevivieron durante dos años, parecieron mejorar los síntomas y no provocaron efectos secundarios negativos. A largo plazo, los científicos planean completar seis operaciones adicionales para 2022 para el tratamiento de la enfermedad.(1)

Referencia Bibliográfica:

1. https://www.closerlookatstemcells.org/2019/04/01/stem-cells-for-parkinsons-therapy-and-tools-for-a-neurological-disorder/

ADN Recombinante

Ejemplo de ADN recombinante en la naturaleza

La recombinación es el mecanismo principal a través del cual se introduce la variación en las poblaciones. Durante la meiosis, los cromosomas homólogos se emparejan y se produce la recombinación o el cruzamiento. Las dos moléculas de ADN están fragmentadas y segmentos similares del cromosoma se mezclan para producir dos nuevos cromosomas, cada uno de los cuales es un mosaico de los originales. El par se separa para que cada espermatozoide u óvulo reciba solo uno de los cromosomas mezclados. Cuando el esperma y el óvulo se fusionan, se restaura el conjunto normal de dos copias de cada cromosoma. (1)

Ejemplo De ADN Recombinante Artificial En La Enfermedad de Parkinson

Se ha estado experimentando y un  modelo para la inducción de α-sinucleína en roedores, se realiza por medio de la inyección de un virus modificado (virus-Cav) para sobre expresar la proteína α-sinucleína en la sustancia nigra de ratas y ratones, su utilización es la más recomendable ya que es menos inmunogénico comparado con otros virus. En otro estudio,se usó un modelo basado en la inyección unilateral de vectores adenovirales (rAd) de serotipo 5 humanos recombinantes de segunda generación que expresan WT humano marcado con FLAG o G2019S LRRK2 impulsado por un promotor de sinapsina-1 humana específico neuronal.(2)

Ejemplo de un transgénico animal o vegetal

Por muchas razones los ratones son las mejores herramientas para estudiar la patogénesis de la EP. Los ratones LRRK2 KO son viables y tienen una vía DA nigroestriatal intacta hasta los 2 años. Estos materiales transgénicos se aplicaron mediante inyección intraestriatal en todos los experimentos. Las características neuropatológicas asociadas con la neurodegeneración o la estructura neuronal alterada estaban ausentes, pero se ha informado de la acumulación de α-syn o ubiquitina en estos ratones. Hasta la fecha, se han desarrollado dos modelos de rata LRRK2 KO, aunque aún se desconocen las consecuencias de la deficiencia de LRRK2 en el cerebro. (3)

Referencias Bibliográficas:

1.https://www.britannica.com/science/nucleic-acid/Recombination

2.https://core.ac.uk/download/pdf/288916677.pdf

3. https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fnana.2014.00155/full#B155

Técnica molecular epigenómica en la Enfermedad de Parkinson: Un análisis piloto de metilación del ADN en genes candidatos en el cerebro

Se analizó si los cinco genes responsables de las formas familiares de la enfermedad de Parkinson podrían estar relacionados con la patogénesis de la EP al tener patrones diferenciales de metilación del ADN. Este enfoque se centró en los niveles de metilación del ADN alrededor de su sitio de inicio de la transcripción.

El análisis de metilación se llevó a cabo mediante pirosecuenciación y ninguna isla mostró diferencias en su nivel de metilación cuando se combinó la información de todos los dinucleótidos CpG, aunque algunas posiciones específicas en SNCA , PRKN y PINK1 mostraron diferencias entre casos y controles en la sustancia negra. Además, se observaron algunas diferencias significativas en dinucleótidos individuales en las cortezas parietal y occipital. (1)

Referencia Bibliográfica: 

1._ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6210421/

Prueba de Tamizaje y Confirmatoria de la Enfermedad de Parkinson

Prueba de Tamizaje

El screening cognitivo es una evaluación breve que permite obtener un esquema general del rendimiento neuropsicológico o cognitivo de una persona. Existen pruebas específicas para la EP como:

Mini-Mental Parkinson (MMP):

Test de 32 puntos, conformado por preguntas y diversas tareas. Posee buenos valores de consistencia interna y validez de constructo, así como confiabilidad inter-evaluador, manteniendo sus propiedades de factibilidad de aplicación.

Parkinson Neuropsychometric Dementia Assessment (PANDA):

De aproximadamente 10 min, basado en tareas que valoran los dominios cognitivos de manera separada: memoria, funciones ejecutivas y habilidades. (1)

Prueba Confirmatoria

No hay una prueba específica para diagnosticar la enfermedad de Parkinson. Se diagnosticará la enfermedad basándose en la historia clínica, una revisión de los signos y síntomas, y un examen físico y neurológico. 

Se puede realizar una tomografía computarizada por emisión monofotónica denominada exploración del transportador de dopamina en el cual: se inyecta por vía intravenosa un trazador radioactivo (loflupano-123l) que es captado en los ganglios basales del cerebro y luego se obtienen imágenes tomogràficas. (2)

Referencias Bibliogràficas: 

1.-http://www.scielo.org.bo/pdf/rip/n18/n18_a03.pdf

2.-https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/parkinsons-disease/diagnosis-treatment/drc-20376062#:~:text=No%20hay%20una%20prueba%20espec%C3%ADfica,un%20examen%20f%C3%ADsico%20y%20neurol%C3%B3gico.